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產(chǎn)品簡介：

本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA），專用于定量檢測(cè)大鼠血清、血漿、組織勻漿及細(xì)胞核提取物中的轉(zhuǎn)錄因子P65（RELA）蛋白濃度。檢測(cè)范圍覆蓋0.313-20 ng/mL，靈敏度達(dá)0.16 ng/mL，適用于NF-κB信號(hào)通路、炎癥反應(yīng)、腫瘤發(fā)生及免疫調(diào)控相關(guān)研究等領(lǐng)域。

產(chǎn)品名稱：大鼠轉(zhuǎn)錄因子P65(RELA)elisa試劑盒

英文名稱：RELA ELISA Kit

產(chǎn)品規(guī)格：48T/96T

產(chǎn)品貨號(hào)：CS-5188E

檢測(cè)原理：

大鼠轉(zhuǎn)錄因子P65(RELA) elisa試劑盒的原理是雙抗體夾心法，通過固相載體捕獲抗原，再用酶標(biāo)記的檢測(cè)抗體進(jìn)行識(shí)別，最后通過底物顯色反應(yīng)來定量檢測(cè)。

固相化：微孔板預(yù)先包被抗大鼠RELA抗體。

結(jié)合：加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣本，RELA被固相抗體捕獲。

檢測(cè)：加入生物su化的抗大鼠RELA抗體和HRP標(biāo)記的親和素，形成"抗體-抗原-酶標(biāo)抗體"復(fù)合物。

顯色：加入TMB底物，被HRP催化后由藍(lán)色變?yōu)辄S色。

測(cè)定：用酶標(biāo)儀在450nm波長測(cè)定吸光度(OD值)，濃度與OD值成正比。

實(shí)驗(yàn)步驟?：

?試劑準(zhǔn)備?：將試劑盒平衡至室溫(20-25℃)，洗滌緩沖液按1:19稀釋。標(biāo)準(zhǔn)品梯度稀釋至所需濃度。

?加樣?：每孔加入100μL標(biāo)準(zhǔn)品或樣本，37℃孵育90分鐘。

?洗滌?：棄去液體，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后甩干，重復(fù)5次。

?加檢測(cè)抗體?：每孔加入100μL檢測(cè)抗體-HRP，37℃孵育60分鐘。

?洗滌?：同步驟3。

?顯色?：每孔加入90μL TMB底物A+B混合液，37℃避光孵育15分鐘。

?終止?：每孔加入50μL終止液，立即搖勻（顏色由藍(lán)變黃）。

?檢測(cè)?：450nm波長測(cè)定吸光度(OD值)，15分鐘內(nèi)完成。

公司正在出售的產(chǎn)品：

操作步驟?：

?1、試劑與樣本準(zhǔn)備?：

將試劑盒平衡至室溫（20-25℃），按說明書稀釋洗滌緩沖液（通常1:19）。

?標(biāo)準(zhǔn)品?：用梯度稀釋至0.313、0.625、1.25、2.5、5、10、20 ng/mL系列濃度。

?樣本?：血清、血漿或組織勻漿上清。若t-PA濃度高，可按說明書（如1:10）稀釋。

?2、加樣與孵育?：

每孔加入100μL標(biāo)準(zhǔn)品或樣本。

輕輕振蕩混勻，避免觸碰孔壁。

37℃孵育90分鐘（部分試劑盒可能為120分鐘，需以說明書為準(zhǔn)）。

?3、洗滌?：

棄去孔內(nèi)液體，用洗滌緩沖液加滿每孔，靜置30秒后甩干，重復(fù)5-6次。

4?、加檢測(cè)抗體與孵育?：

每孔加入100μL化抗豬t-PA檢測(cè)抗體。

37℃孵育60分鐘。

5?、再次洗滌?：

同步驟3，洗去未結(jié)合抗體。

6?、顯色?：

每孔加入90-100μL TMB底物混合液（A液+B液）。

37℃避光孵育10-15分鐘。

?7、終止與測(cè)定?：

每孔加入50μL終止液，立即混勻（顏色由藍(lán)變黃）。

在加終止液后15分鐘內(nèi)，用酶標(biāo)儀在450nm波長處測(cè)定各孔吸光度（OD值）。