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產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA），專用于定量檢測(cè)大鼠血清、血漿中的血管性血友病因子裂解酶（vWF-cp）蛋白濃度/活性。檢測(cè)范圍覆蓋0.313-20 U/mL，靈敏度達(dá)0.16 U/mL，適用于凝血功能調(diào)控、血管性血友病、血栓形成及出血性疾病相關(guān)研究等領(lǐng)域。

產(chǎn)品名稱：大鼠血管性血友病因子裂解酶elisa試劑盒

英文名稱：vWF-cp ELISA Kit

產(chǎn)品規(guī)格：48T/96T

產(chǎn)品貨號(hào)：CS-5347E

檢測(cè)原理：

大鼠血管性血友病因子裂解酶(vWF-cp)elisa試劑盒的原理是雙抗體夾心法，通過(guò)固相載體捕獲抗原，再用酶標(biāo)記的檢測(cè)抗體進(jìn)行識(shí)別，最后通過(guò)底物顯色反應(yīng)來(lái)定量檢測(cè)。

固相化：微孔板預(yù)先包被抗大鼠vWF-cp抗體。

結(jié)合：加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣本，vWF-cp被固相抗體捕獲。

檢測(cè)：加入生物su化的抗大鼠vWF-cp抗體和HRP標(biāo)記的親和素，形成"抗體-抗原-酶標(biāo)抗體"復(fù)合物。

顯色：加入TMB底物，被HRP催化后由藍(lán)色變?yōu)辄S色。

測(cè)定：用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)測(cè)定吸光度(OD值)，濃度與OD值成正比。

實(shí)驗(yàn)步驟?：

?試劑準(zhǔn)備?：將試劑盒平衡至室溫(20-25℃)，洗滌緩沖液按1:19稀釋。標(biāo)準(zhǔn)品梯度稀釋至所需濃度。

?加樣?：每孔加入100μL標(biāo)準(zhǔn)品或樣本，37℃孵育90分鐘。

?洗滌?：棄去液體，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后甩干，重復(fù)5次。

?加檢測(cè)抗體?：每孔加入100μL檢測(cè)抗體-HRP，37℃孵育60分鐘。

?洗滌?：同步驟3。

?顯色?：每孔加入90μL TMB底物A+B混合液，37℃避光孵育15分鐘。

?終止?：每孔加入50μL終止液，立即搖勻（顏色由藍(lán)變黃）。

?檢測(cè)?：450nm波長(zhǎng)測(cè)定吸光度(OD值)，15分鐘內(nèi)完成。

公司正在出售的產(chǎn)品：

關(guān)鍵實(shí)操技巧：

1.加樣技巧

一次性換新槍頭，垂直貼孔壁低位加液；避免氣泡、飛濺交叉污染；整板加樣速度均勻統(tǒng)一。

2.溫育控溫

須37℃恒溫、封板膜嚴(yán)實(shí)防蒸發(fā)冷凝；時(shí)間嚴(yán)格卡死，過(guò)長(zhǎng)背景高、過(guò)短信號(hào)低。

3.洗板核心

每孔注滿不溢出，浸泡≥30 s；拍干用無(wú)塵吸水紙，杜絕殘留；洗板不足直接高背景、假陽(yáng)性。

4.樣本規(guī)范

杜溶血、脂濁、污染樣本；禁止反復(fù)凍融；嚴(yán)禁含 NaN?抑制 HRP 活性；濃度超標(biāo)只用試劑盒配套稀釋液。

5.顯色與讀數(shù)

全避光；整板顯色時(shí)長(zhǎng)一致；加終止液立刻讀數(shù)，放置越久數(shù)值漂移越大。

6.基礎(chǔ)質(zhì)控

樣本、標(biāo)準(zhǔn)均做復(fù)孔；室溫潔凈避光操作；試劑分裝取用，減少反復(fù)開(kāi)蓋失效。