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產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA），專(zhuān)用于定量檢測(cè)大鼠血清、血漿、組織勻漿及細(xì)胞上清液中的血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子D（VEGF-D）蛋白濃度。檢測(cè)范圍覆蓋0.313-20 ng/mL，靈敏度達(dá)0.16 ng/mL，適用于血管生成、淋巴管生成、腫瘤轉(zhuǎn)移及心血管疾病相關(guān)研究等領(lǐng)域。

產(chǎn)品名稱(chēng)：大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子Delisa試劑盒

英文名稱(chēng)：VEGF-D ELISA Kit

產(chǎn)品規(guī)格：48T/96T

產(chǎn)品貨號(hào)：CS-5359E

檢測(cè)原理：

大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子D(VEGF-D)elisa試劑盒的原理是雙抗體夾心法，通過(guò)固相載體捕獲抗原，再用酶標(biāo)記的檢測(cè)抗體進(jìn)行識(shí)別，最后通過(guò)底物顯色反應(yīng)來(lái)定量檢測(cè)。

固相化：微孔板預(yù)先包被抗大鼠VEGF-D抗體。

結(jié)合：加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣本，VEGF-D被固相抗體捕獲。

檢測(cè)：加入生物su化的抗大鼠VEGF-D抗體和HRP標(biāo)記的親和素，形成"抗體-抗原-酶標(biāo)抗體"復(fù)合物。

顯色：加入TMB底物，被HRP催化后由藍(lán)色變?yōu)辄S色。

測(cè)定：用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)測(cè)定吸光度(OD值)，濃度與OD值成正比。

實(shí)驗(yàn)步驟?：

?1. 試劑回溫至 20–25℃，稀釋洗滌液、梯度配制標(biāo)準(zhǔn)品。

2. 每孔加 100μL 標(biāo)準(zhǔn) / 樣本，37℃孵育 90min，洗板 5 次。

3. 加 HRP 抗體，37℃孵育 60min，再次洗板 5 次。

4. 加 TMB 避光顯色 15min，加終止液混勻。

5. 450nm 快速測(cè) OD 值，擬合曲線算濃度。

公司正在出售的產(chǎn)品：

操作步驟?：

?1、試劑與樣本準(zhǔn)備?：

將試劑盒平衡至室溫（20-25℃），按說(shuō)明書(shū)稀釋洗滌緩沖液（通常1:19）。

?標(biāo)準(zhǔn)品?：用梯度稀釋至0.313、0.625、1.25、2.5、5、10、20 ng/mL系列濃度。

?樣本?：血清、血漿或組織勻漿上清。若t-PA濃度高，可按說(shuō)明書(shū)（如1:10）稀釋。

?2、加樣與孵育?：

每孔加入100μL標(biāo)準(zhǔn)品或樣本。

輕輕振蕩混勻，避免觸碰孔壁。

37℃孵育90分鐘（部分試劑盒可能為120分鐘，需以說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)）。

?3、洗滌?：

棄去孔內(nèi)液體，用洗滌緩沖液加滿每孔，靜置30秒后甩干，重復(fù)5-6次。

4?、加檢測(cè)抗體與孵育?：

每孔加入100μL化抗豬t-PA檢測(cè)抗體。

37℃孵育60分鐘。

5?、再次洗滌?：

同步驟3，洗去未結(jié)合抗體。

6?、顯色?：

每孔加入90-100μL TMB底物混合液（A液+B液）。

37℃避光孵育10-15分鐘。

?7、終止與測(cè)定?：

每孔加入50μL終止液，立即混勻（顏色由藍(lán)變黃）。

在加終止液后15分鐘內(nèi)，用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔吸光度（OD值）。