本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA),專用于定量檢測小鼠血清、血漿、組織勻漿及細胞上清液中的 opiorphin 濃度。檢測范圍覆蓋 0.313-20 ng/mL,靈敏度達 0.16 ng/mL,適用于鎮(zhèn)痛調(diào)控、肽酶抑制及神經(jīng)肽代謝研究等領(lǐng)域。
產(chǎn)品名稱 |
(小鼠opiorphin)elisa試劑盒 | 英文名稱 | 小鼠opiorphin ELISA Kit |
貨號 | CS-1336E | 規(guī)格 | 48T/96T |
保存 | 避光保存 | 用途 | 僅供科研實驗 |
核心原理:

固相化:微孔板預先包被抗小鼠 opiorphin 抗體。
結(jié)合:加入標準品或樣本,opiorphin 被固相抗體捕獲。
檢測:加入化的抗小鼠 opiorphin 抗體和 HRP 標記的親和素,形成 "抗體 - 抗原 - 酶標抗體" 復合物。
顯色:加入 TMB 底物,被 HRP 催化后由藍色變?yōu)辄S色。
測定:用酶標儀在 450nm 波長測定吸光度 (OD 值),濃度與 OD 值成正比。
樣本要求:

1. 血清:避免溶血脂血,離心分離,-20℃分裝,禁反復凍融。
2. 血漿:EDTA / 檸檬酸鹽抗凝,慎用肝素,離心取上清。
3. 細胞上清:離心除雜質(zhì),-80℃保存。
4. 組織勻漿:冰上勻漿、高速離心取上清低溫儲存。
5. 禁忌:勿加疊氮鈉抑制 HRP;拒收污染溶血樣本,建議復孔檢測。
操作步驟:

試劑準備將試劑盒平衡至室溫(20-25℃),濃縮洗滌液按 1:20 稀釋備用。標準品按說明書進行梯度稀釋,配制系列濃度標準曲線溶液。
實驗流程加樣:設(shè)置空白孔、標準孔、待測樣品孔,空白孔僅加稀釋液,其余孔分別加入標準品或待測樣品,37℃孵育。加酶標抗體:除空白孔外,每孔加入酶標抗體,輕輕混勻,37℃避光孵育。洗滌:棄去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后甩干,重復洗滌 4-5 次,最后拍干殘留液體。顯色:每孔加入 TMB 顯色液,37℃避光孵育,孔內(nèi)呈現(xiàn)藍色。終止:每孔加入終止液,混勻后顏色由藍色轉(zhuǎn)為黃色。檢測:在 450nm 波長下測定各孔 OD 值,15 分鐘內(nèi)完成讀數(shù)。
關(guān)鍵提示實驗全程嚴格控溫,孵育時使用封板膜避免蒸發(fā)。洗滌需充分,否則易造成高背景、結(jié)果偏差。顯色液需避光,終止順序與加樣順序保持一致,確保充分混勻。
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