產品簡介:

本試劑盒采用速率法酶聯免疫吸附法(ELISA),專用于定量檢測大鼠組織勻漿、細胞提取物中的 β 半乳糖苷酶(βGAL)活性。檢測范圍覆蓋 0.313-20 U/L,靈敏度達 0.16 U/L,適用于溶酶體功能、基因表達檢測、腫瘤研究及酶活性分析等領域。
產品名稱:大鼠β半乳糖苷酶(βGAL)elisa試劑盒
英文名稱:βGAL ELISA Kit
產品規格:48T/96T
產品貨號:CS-6127E
檢測原理:

大鼠 β 半乳糖苷酶 (βGAL) ELISA 試劑盒的原理是速率法,通過 βGAL 催化特異性底物的水解反應,生成的產物與顯色劑作用,利用吸光度變化速率定量檢測酶活性。
固相化:微孔板預先包被 βGAL 特異性熒光 / 顯色底物。
結合:加入標準品或樣本,βGAL 催化底物發生水解反應生成顯色產物。
檢測:直接檢測產物的吸光度變化,無需額外二抗孵育。
顯色:產物隨酶促反應持續生成,顏色深淺與 βGAL 活性相關。
測定:用酶標儀在 450nm 波長連續測定吸光度變化速率,活性與速率值成正比。
實驗步驟?:

?試劑準備?:將試劑盒平衡至室溫(20-25℃),洗滌緩沖液按1:19稀釋。標準品梯度稀釋至所需濃度。
?加樣?:每孔加入100μL標準品或樣本,37℃孵育90分鐘。
?洗滌?:棄去液體,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后甩干,重復5次。
?加檢測抗體?:每孔加入100μL檢測抗體-HRP,37℃孵育60分鐘。
?洗滌?:同步驟3。
?顯色?:每孔加入90μL TMB底物A+B混合液,37℃避光孵育15分鐘。
?終止?:每孔加入50μL終止液,立即搖勻(顏色由藍變黃)。
?檢測?:450nm波長測定吸光度(OD值),15分鐘內完成。
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操作步驟?:

?1.試劑準備
將試劑盒平衡至室溫(20-25℃),濃縮洗滌液按 1:20 稀釋備用。
標準品按說明書進行梯度稀釋,配制系列濃度標準曲線溶液。
2.實驗流程
加樣:設置空白孔、標準孔、待測樣品孔,空白孔僅加稀釋液,其余孔分別加入標準品或待測樣品,37℃孵育。
加酶標抗體:除空白孔外,每孔加入酶標抗體,輕輕混勻,37℃避光孵育。
洗滌:棄去孔內液體,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后甩干,重復洗滌 4-5 次,最后拍干殘留液體。
顯色:每孔加入 TMB 顯色液,37℃避光孵育,孔內呈現藍色。
終止:每孔加入終止液,混勻后顏色由藍色轉為黃色。
檢測:在 450nm 波長下測定各孔 OD 值,15 分鐘內完成讀數。
3.關鍵提示
實驗全程嚴格控溫,孵育時使用封板膜避免蒸發。
洗滌需充分,否則易造成高背景、結果偏差。
顯色液需避光,終止順序與加樣順序保持一致,確保充分混勻。