產品簡介：
本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯免疫吸附法（ELISA），專用于定量檢測大鼠血清、血漿、腦組織勻漿、神經組織提取物及細胞上清液中的神經營養因子 4（NT-4）蛋白濃度。檢測范圍覆蓋對應梯度區間，靈敏度達對應檢出限值，適用于神經發育、神經元存活、神經損傷修復及退行性神經系統疾病等研究領域。
產品名稱：大鼠神經營養因子4(NT-4)elisa試劑盒
英文名稱：NT-4 ELISA Kit
產品規格：48T/96T
產品貨號：CS-5515E
檢測原理：
大鼠神經營養因子 4 (NT-4) ELISA 試劑盒的原理是雙抗體夾心法，通過固相載體捕獲抗原，再用酶標記的檢測抗體進行識別，最后通過底物顯色反應來定量檢測。
固相化：微孔板預先包被抗大鼠 NT-4 抗體。
結合：加入標準品或樣本，NT-4 被固相抗體捕獲。
檢測：加入生物su化的抗大鼠 NT-4 抗體和 HRP 標記的親和素，形成 "抗體 - 抗原 - 酶標抗體" 復合物。
顯色：加入 TMB 底物，被 HRP 催化后由藍色變為黃色。
測定：用酶標儀在 450nm 波長測定吸光度 (OD 值)，濃度與 OD 值成正比。
實驗步驟?：
?試劑準備?：將試劑盒平衡至室溫(20-25℃)，洗滌緩沖液按1:19稀釋。標準品梯度稀釋至所需濃度。
?加樣?：每孔加入100μL標準品或樣本，37℃孵育90分鐘。
?洗滌?：棄去液體，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后甩干，重復5次。
?加檢測抗體?：每孔加入100μL檢測抗體-HRP，37℃孵育60分鐘。
?洗滌?：同步驟3。
?顯色?：每孔加入90μL TMB底物A+B混合液，37℃避光孵育15分鐘。
?終止?：每孔加入50μL終止液，立即搖勻（顏色由藍變黃）。
?檢測?：450nm波長測定吸光度(OD值)，15分鐘內完成。
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操作步驟?：
1.試劑平衡試劑盒室溫平衡 30 min；濃縮洗滌液按說明書稀釋混勻。
2.設孔加樣設空白、標準品、待測樣品孔，精準加樣，封板。
3.溫育結合37℃孵育 30–60 min，棄液拍干。
4.洗板加滿洗滌液浸泡，甩干拍干，重復3–5 次。
5.加酶結合物除空白孔外每孔加 HRP 標記液，封板 37℃孵育。
6.再次洗板充分洗凈未結合游離酶，控干殘留液體。
7.顯色避光加顯色液 A/B，避光 37℃顯色 10–15 min。
8.終止讀數加終止液變色穩定后，立刻酶標儀讀 OD 值。
9.結果計算標準曲線擬合，換算樣本濃度。
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