本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA),專用于定量檢測大鼠血清、血漿、組織勻漿及細胞上清液中的濃度。檢測范圍覆蓋 0.313-20 ng/mL,靈敏度達 0.16 ng/mL,適用于胃黏膜功能、蛋白消化、胃黏膜損傷及胃部病變評估研究等領(lǐng)域。
產(chǎn)品名稱 |
大鼠(PG)elisa試劑盒 | 英文名稱 | PG ELISA Kit |
貨號 | CS-5429E | 規(guī)格 | 48T/96T |
保存 | 避光保存 | 用途 | 僅供科研實驗 |
核心原理:

固相化:微孔板預先包被抗大鼠 PG 抗體。
結(jié)合:加入標準品或樣本,PG 被固相抗體捕獲。
檢測:加入化的抗大鼠 PG 抗體和 HRP 標記的親和素,形成 "抗體 - 抗原 - 酶標抗體" 復合物。
顯色:加入 TMB 底物,被 HRP 催化由藍色變?yōu)辄S色。
測定:用酶標儀在 450nm 波長測定吸光度 (OD 值),濃度與 OD 值成正比。
樣本要求:

1. 樣本類型與處理
血清:無熱源無菌采血管采集,杜絕溶血、脂血污染;1000×g 離心 10 min 分離上清,-20℃分裝保存,嚴禁反復凍融。血漿:選用 EDTA / 檸檬酸鹽 / 肝素抗凝管采血混勻,離心去除血細胞取上清備用(部分試劑盒慎用肝素)。細胞上清:收集后 1000×g 離心 10 min 去除細胞碎片與雜質(zhì),-70~-80℃低溫保存。組織勻漿:預冷生理鹽水 / PBS 冰上制備勻漿,高速離心取澄清上清,-20℃避光分裝貯存。
2. 通用注意事項
1) 樣本嚴禁添加疊氮鈉(NaN?),會抑制 HRP 酶活性,導致顯色失效。
2) 所有樣本避免室溫久置,全程低溫操作,防止蛋白降解。
3) 溶血、渾濁、微生物污染樣本直接廢棄,干擾抗體抗原結(jié)合。
4) 細胞上清、低豐度指標樣本務必設(shè)置復孔,校正實驗誤差。
5) 檢測濃度超標時,僅用試劑盒配套稀釋液稀釋,匹配基質(zhì)體系。
操作步驟:

1.試劑提前室溫平衡 30 min,濃縮洗滌液按說明書稀釋配制。
2.設(shè)置空白孔、標準品孔、待測樣品孔,精準加樣后封板。
3.37℃恒溫孵育結(jié)合反應,結(jié)束后棄孔內(nèi)液體拍干。
4.加滿洗滌液浸泡清洗,重復洗板 3–5 次,去除未結(jié)合雜質(zhì)。
5.除空白孔外,每孔加入 HRP 酶結(jié)合物,再次 37℃溫育。
6.重復洗板流程洗凈游離酶標抗體,保證背景干凈。
7.依次加入顯色液避光顯色,待梯度藍色清晰顯現(xiàn)。
8.加入終止液終止反應,顏色由藍轉(zhuǎn)黃,即刻用酶標儀讀取 OD 值。
9.根據(jù)標準曲線擬合計算,得出樣本目標物質(zhì)濃度。
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