產品簡介：
本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯免疫吸附法（ELISA），專用于定量檢測大鼠組織勻漿、細胞提取物中的泛素連接酶（E3/UBPL）蛋白濃度。檢測范圍覆蓋 0.313-20 ng/mL，靈敏度達 0.16 ng/mL，適用于泛素化修飾、蛋白質降解、細胞周期調控及腫瘤研究等領域。
產品名稱：大鼠泛素連接酶(E3/UBPL)elisa試劑盒
英文名稱：E3/UBPL ELISA Kit
產品規格：48T/96T
產品貨號：CS-5944E
檢測原理：
大鼠泛素連接酶 (E3/UBPL) ELISA 試劑盒的原理是?雙抗體夾心法?，通過固相載體捕獲抗原，再用酶標記的檢測抗體進行識別，最后通過底物顯色反應來定量檢測。
?固相化?：微孔板預先包被抗大鼠 E3/UBPL 抗體。
?結合?：加入標準品或樣本，E3/UBPL 被固相抗體捕獲。
?檢測?：加入生物su化的抗大鼠 E3/UBPL 抗體和 HRP 標記的親和素，形成 "抗體 - 抗原 - 酶標抗體" 復合物。
?顯色?：加入 TMB 底物，被 HRP 催化后由藍色變為黃色。
?測定?：用酶標儀在 450nm 波長測定吸光度 (OD 值)，濃度與 OD 值成正比。
實驗步驟?：
?試劑準備?：將試劑盒平衡至室溫(20-25℃)，洗滌緩沖液按1:19稀釋。標準品梯度稀釋至所需濃度。
?加樣?：每孔加入100μL標準品或樣本，37℃孵育90分鐘。
?洗滌?：棄去液體，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后甩干，重復5次。
?加檢測抗體?：每孔加入100μL檢測抗體-HRP，37℃孵育60分鐘。
?洗滌?：同步驟3。
?顯色?：每孔加入90μL TMB底物A+B混合液，37℃避光孵育15分鐘。
?終止?：每孔加入50μL終止液，立即搖勻（顏色由藍變黃）。
?檢測?：450nm波長測定吸光度(OD值)，15分鐘內完成。
公司正在出售的產品：
兔sTNFR1/TNFRS1Aelisa試劑盒 | 苦參探針法PCR鑒定試劑盒 |
大鼠基質細胞衍生因子1(SDF-1)elisa試劑盒 | 貓杯狀病毒前病毒探針法熒光定量PCR試劑盒 |
豬流感病毒抗體(EIV-Ab)elisa定性檢測試劑盒 | 禽腺病毒E型探針法熒光定量PCR試劑盒 |
大鼠繆勒管抑制物質/抗繆勒管(MIS/AMH)ELISA試劑盒 | 島染料法熒光定量PCR試劑盒 |
小鼠Lipocalin-2elisa試劑盒 | 傳染性脾腎壞死病病毒染料法熒光定量PCR試劑盒 |
大鼠5羥色胺2C(5-HT2C)elisa試劑盒 | 阿菲波屬通用染料法熒光定量PCR試劑盒 |
大鼠同線蛋白2(ST2)elisa試劑盒 | 雞傷染料法熒光定量PCR試劑盒 |
植物草酸氧化酶（OxO）elisa試劑盒 | 豬生殖與呼吸綜合癥病毒歐洲株染料法熒光定量RT-PCR試劑盒 |
大鼠;蛋白B-raf(BRAF)elisa試劑盒 | 對蝦桿狀病毒染料法熒光定量PCR試劑盒 |
豬前蛋白轉化酶枯草溶素9（PCSK9）elisa試劑盒 |
大鼠泛素連接酶(E3/UBPL)elisa試劑盒人腺病毒D74型探針法熒光定量PCR試劑盒 |
小鼠抗SSB IgG抗體（SSB IgG）elisa試劑盒 | 馬兜鈴探針法PCR鑒定試劑盒 |
鮭魚補體蛋白3(C3)ELISA試劑盒 | 口蹄疫病毒A亞型染料法熒光定量RT-PCR試劑盒 |
操作步驟?：
1. 試劑準備
將試劑盒所有組分平衡至室溫（20–25℃，≥30min）；濃縮洗滌液按 1:19 稀釋配制工作液。
標準品用標準品稀釋液復溶，梯度稀釋，配置系列濃度梯度標準溶液，備用。
2. 實驗流程
加樣：設置空白孔、標準孔、樣本孔，每孔加入 100 μL 對應標準品 / 待測樣本，封板，37℃恒溫孵育 90 min。
洗滌：棄凈孔內液體，每孔加滿洗滌工作液，靜置 30 s，甩干拍凈，重復洗滌 5 次。
加酶結合物：每孔加入 100 μL HRP 標記檢測抗體，封板混勻，37℃孵育 60 min。
洗滌：重復上述洗滌步驟 5 次，拍干微孔。
顯色：每孔避光加入 90 μL TMB 底物顯色液，輕柔混勻，37℃避光顯色 15 min。
終止：按同等順序每孔快速加入 50 μL 終止液，輕晃混勻，溶液由藍轉黃。
讀數：15 min 內，酶標儀 450 nm 波長測定各孔 OD 值，擬合標準曲線計算樣本含量。
3. 關鍵質控要點
全程孵育使用專用封板膜，防止液體蒸發、交叉污染。
洗滌充分為實驗核心，殘留洗液易造成背景偏高、假陽性。
TMB 顯色液避光儲存，現用現加，嚴禁接觸氧化劑。
加終止液順序需與顯色加樣一致，避免局部色差、綠色殘留。
點擊放大
