產品簡介:

本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA),專用于定量檢測大鼠血清、血漿、肝臟組織勻漿及細胞上清液中的對氧磷酶 1(PON1)蛋白濃度。檢測范圍覆蓋 0.313-20 ng/mL,靈敏度達 0.16 ng/mL,適用于氧化應激、脂質過氧化、心血管疾病及有機磷毒物代謝研究領域。
產品名稱:大鼠對氧磷酶1(PON1)elisa試劑盒
英文名稱:PON1 ELISA Kit
產品規(guī)格:48T/96T
產品貨號:CS-5962E
檢測原理:

大鼠對氧磷酶 1 (PON1) ELISA 試劑盒的原理是雙抗體夾心法,通過固相載體捕獲抗原,再用酶標記的檢測抗體進行識別,最后通過底物顯色反應來定量檢測。
固相化:微孔板預先包被抗大鼠 PON1 抗體。
結合:加入標準品或樣本,PON1 被固相抗體捕獲。
檢測:加入生物su化的抗大鼠 PON1 抗體和 HRP 標記的親和素,形成 "抗體 - 抗原 - 酶標抗體" 復合物。
顯色:加入 TMB 底物,被 HRP 催化后由藍色變?yōu)辄S色。
測定:用酶標儀在 450nm 波長測定吸光度 (OD 值),濃度與 OD 值成正比。
實驗步驟?:

1.試劑平衡試劑盒室溫平衡 30 min;濃縮洗滌液按說明書稀釋混勻。
2.設孔加樣設空白、標準品、待測樣品孔,精準加樣,封板。
3.溫育結合37℃孵育 30–60 min,棄液拍干。
4.洗板加滿洗滌液浸泡,甩干拍干,重復3–5 次。
5.加酶結合物除空白孔外每孔加 HRP 標記液,封板 37℃孵育。
6.再次洗板充分洗凈未結合游離酶,控干殘留液體。
7.顯色避光加顯色液 A/B,避光 37℃顯色 10–15 min。
8.終止讀數(shù)加終止液變色穩(wěn)定后,立刻酶標儀讀 OD 值。
9.結果計算標準曲線擬合,換算樣本濃度。
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操作步驟?:

?1、試劑與樣本準備?:
將試劑盒平衡至室溫(20-25℃),按說明書稀釋洗滌緩沖液(通常1:19)。
?標準品?:用梯度稀釋至0.313、0.625、1.25、2.5、5、10、20 ng/mL系列濃度。
?樣本?:血清、血漿或組織勻漿上清。若t-PA濃度高,可按說明書(如1:10)稀釋。
?2、加樣與孵育?:
每孔加入100μL標準品或樣本。
輕輕振蕩混勻,避免觸碰孔壁。
37℃孵育90分鐘(部分試劑盒可能為120分鐘,需以說明書為準)。
?3、洗滌?:
棄去孔內液體,用洗滌緩沖液加滿每孔,靜置30秒后甩干,重復5-6次。
4?、加檢測抗體與孵育?:
每孔加入100μL化抗豬t-PA檢測抗體。
37℃孵育60分鐘。
5?、再次洗滌?:
同步驟3,洗去未結合抗體。
6?、顯色?:
每孔加入90-100μL TMB底物混合液(A液+B液)。
37℃避光孵育10-15分鐘。
?7、終止與測定?:
每孔加入50μL終止液,立即混勻(顏色由藍變黃)。
在加終止液后15分鐘內,用酶標儀在450nm波長處測定各孔吸光度(OD值)。