產(chǎn)品簡介：
本試劑盒采用競爭法酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA），專用于定量檢測大鼠血清、血漿、紅細(xì)胞提取物中的 FEP 含量。檢測范圍覆蓋 0.313-20 ng/mL，靈敏度達(dá) 0.16 ng/mL，適用于缺鐵性貧血、卟啉病、重金屬中毒及造血功能研究等領(lǐng)域。
產(chǎn)品名稱：大鼠游離原卟啉(FEP)elisa試劑盒
英文名稱：FEP ELISA Kit
產(chǎn)品規(guī)格：48T/96T
產(chǎn)品貨號：CS-5254E
檢測原理：
大鼠游離原卟啉 (FEP) elisa 試劑盒的原理是?競爭法?，通過固相載體包被抗原，樣本中抗原與固相抗原競爭結(jié)合特異性抗體，最后通過底物顯色反應(yīng)來定量檢測。
?固相化?：微孔板預(yù)先包被 FEP 人工抗原。
?結(jié)合?：加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣本與特異性抗體混合液，F(xiàn)EP 與固相抗原競爭結(jié)合抗體。
?檢測?：加入 HRP 標(biāo)記的二抗，與結(jié)合在固相載體上的抗體形成復(fù)合物。
?顯色?：加入 TMB 底物，被 HRP 催化后由藍(lán)色變?yōu)辄S色。
?測定?：用酶標(biāo)儀在 450nm 波長測定吸光度 (OD 值)，濃度與 OD 值成反比。
實驗步驟?：
?試劑準(zhǔn)備?：將試劑盒平衡至室溫(20-25℃)，洗滌緩沖液按1:19稀釋。標(biāo)準(zhǔn)品梯度稀釋至所需濃度。
?加樣?：每孔加入100μL標(biāo)準(zhǔn)品或樣本，37℃孵育90分鐘。
?洗滌?：棄去液體，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后甩干，重復(fù)5次。
?加檢測抗體?：每孔加入100μL檢測抗體-HRP，37℃孵育60分鐘。
?洗滌?：同步驟3。
?顯色?：每孔加入90μL TMB底物A+B混合液，37℃避光孵育15分鐘。
?終止?：每孔加入50μL終止液，立即搖勻（顏色由藍(lán)變黃）。
?檢測?：450nm波長測定吸光度(OD值)，15分鐘內(nèi)完成。
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操作步驟?：
1. 試劑回溫至 20–25℃，稀釋洗滌液、梯度配制標(biāo)準(zhǔn)品。
2. 每孔加 100μL 標(biāo)準(zhǔn) / 樣本，37℃孵育 90min，洗板 5 次。
3. 加 HRP 抗體，37℃孵育 60min，再次洗板 5 次。
4. 加 TMB 避光顯色 15min，加終止液混勻。
5. 450nm 快速測 OD 值，擬合曲線算濃度。
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