產品簡介:

本試劑盒采用速率法酶聯免疫吸附法(ELISA),專用于定量檢測大鼠血清、血漿、肝組織勻漿中的 αL 巖藻糖苷酶(AFU)活性。檢測范圍覆蓋 0.313-20 U/L,靈敏度達 0.16 U/L,適用于肝癌篩查、肝功能檢測、溶酶體功能及遺傳性代謝病研究等領域。
產品名稱:大鼠αL巖藻糖苷酶(AFU)elisa試劑盒
英文名稱:AFU ELISA Kit
產品規格:48T/96T
產品貨號:CS-6139E
檢測原理:

大鼠 αL 巖藻糖苷酶 (AFU) ELISA 試劑盒的原理是速率法,通過 AFU 催化巖藻糖苷底物的水解反應,生成的產物與顯色劑作用,利用吸光度變化速率定量檢測酶活性。
固相化:微孔板預先包被 AFU 特異性顯色底物。
結合:加入標準品或樣本,AFU 催化底物水解生成顯色產物。
檢測:直接檢測產物的吸光度變化,無需額外二抗孵育。
顯色:產物隨酶促反應持續生成,顏色深淺與 AFU 活性相關。
測定:用酶標儀在 450nm 波長連續測定吸光度變化速率,活性與速率值成正比。
實驗步驟?:

?試劑準備?:將試劑盒平衡至室溫(20-25℃),洗滌緩沖液按1:19稀釋。標準品梯度稀釋至所需濃度。
?加樣?:每孔加入100μL標準品或樣本,37℃孵育90分鐘。
?洗滌?:棄去液體,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后甩干,重復5次。
?加檢測抗體?:每孔加入100μL檢測抗體-HRP,37℃孵育60分鐘。
?洗滌?:同步驟3。
?顯色?:每孔加入90μL TMB底物A+B混合液,37℃避光孵育15分鐘。
?終止?:每孔加入50μL終止液,立即搖勻(顏色由藍變黃)。
?檢測?:450nm波長測定吸光度(OD值),15分鐘內完成。
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操作步驟?:

?1.試劑提前室溫平衡 30 min,濃縮洗滌液按說明書稀釋配制。
2.設置空白孔、標準品孔、待測樣品孔,精準加樣后封板。
3.37℃恒溫孵育結合反應,結束后棄孔內液體拍干。
4.加滿洗滌液浸泡清洗,重復洗板 3–5 次,去除未結合雜質。
5.除空白孔外,每孔加入 HRP 酶結合物,再次 37℃溫育。
6.重復洗板流程洗凈游離酶標抗體,保證背景干凈。
7.依次加入顯色液避光顯色,待梯度藍色清晰顯現。
8.加入終止液終止反應,顏色由藍轉黃,即刻用酶標儀讀取 OD 值。
9.根據標準曲線擬合計算,得出樣本目標物質濃度。