產品簡介:

本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯免疫吸附法(ELISA),專用于定量檢測大鼠血清、血漿、組織勻漿及細胞上清液中的干擾素誘導蛋白 10(IP-10/CXCL10)蛋白濃度。檢測范圍覆蓋 0.313-20 ng/mL,靈敏度達 0.16 ng/mL,適用于免疫調控、炎癥反應、病毒感染及腫瘤免疫研究等領域。
產品名稱:大鼠干擾素誘導蛋白10elisa試劑盒
英文名稱:IP-10/CXCL10 ELISA Kit
產品規格:48T/96T
產品貨號:CS-5917E
檢測原理:

大鼠干擾素誘導蛋白 10 (IP-10/CXCL10) ELISA 試劑盒的原理是?雙抗體夾心法?,通過固相載體捕獲抗原,再用酶標記的檢測抗體進行識別,最后通過底物顯色反應來定量檢測。
?固相化?:微孔板預先包被抗大鼠 IP-10/CXCL10 抗體。
?結合?:加入標準品或樣本,IP-10/CXCL10 被固相抗體捕獲。
?檢測?:加入生物su化的抗大鼠 IP-10/CXCL10 抗體和 HRP 標記的親和素,形成 "抗體 - 抗原 - 酶標抗體" 復合物。
?顯色?:加入 TMB 底物,被 HRP 催化后由藍色變為黃色。
?測定?:用酶標儀在 450nm 波長測定吸光度 (OD 值),濃度與 OD 值成正比。
實驗步驟?:

1.試劑提前室溫平衡 30 min,濃縮洗滌液按說明書稀釋配制。
2.設置空白孔、標準品孔、待測樣品孔,精準加樣后封板。
3.37℃恒溫孵育結合反應,結束后棄孔內液體拍干。
4.加滿洗滌液浸泡清洗,重復洗板 3–5 次,去除未結合雜質。
5.除空白孔外,每孔加入 HRP 酶結合物,再次 37℃溫育。
6.重復洗板流程洗凈游離酶標抗體,保證背景干凈。
7.依次加入顯色液避光顯色,待梯度藍色清晰顯現。
8.加入終止液終止反應,顏色由藍轉黃,即刻用酶標儀讀取 OD 值。
9.根據標準曲線擬合計算,得出樣本目標物質濃度。
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操作步驟?:

?1、試劑與樣本準備?:
將試劑盒平衡至室溫(20-25℃),按說明書稀釋洗滌緩沖液(通常1:19)。
?標準品?:用梯度稀釋至0.313、0.625、1.25、2.5、5、10、20 ng/mL系列濃度。
?樣本?:血清、血漿或組織勻漿上清。若t-PA濃度高,可按說明書(如1:10)稀釋。
?2、加樣與孵育?:
每孔加入100μL標準品或樣本。
輕輕振蕩混勻,避免觸碰孔壁。
37℃孵育90分鐘(部分試劑盒可能為120分鐘,需以說明書為準)。
?3、洗滌?:
棄去孔內液體,用洗滌緩沖液加滿每孔,靜置30秒后甩干,重復5-6次。
4?、加檢測抗體與孵育?:
每孔加入100μL化抗豬t-PA檢測抗體。
37℃孵育60分鐘。
5?、再次洗滌?:
同步驟3,洗去未結合抗體。
6?、顯色?:
每孔加入90-100μL TMB底物混合液(A液+B液)。
37℃避光孵育10-15分鐘。
?7、終止與測定?:
每孔加入50μL終止液,立即混勻(顏色由藍變黃)。
在加終止液后15分鐘內,用酶標儀在450nm波長處測定各孔吸光度(OD值)。