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產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

本試劑盒采用競(jìng)爭(zhēng)法酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA），專用于定量檢測(cè)大鼠血清、血漿中的脫氫表雄酮硫酸酯（DHEA-S）含量。檢測(cè)范圍覆蓋 0.313-20 ng/mL，靈敏度達(dá) 0.16 ng/mL，適用于腎上腺皮質(zhì)功能、性激素合成、內(nèi)分泌紊亂及衰老研究等領(lǐng)域。

產(chǎn)品名稱：大鼠脫氫表雄酮硫酸酯(DHEA-S)elisa試劑盒

英文名稱：DHEA-S ELISA Kit

產(chǎn)品規(guī)格：48T/96T

產(chǎn)品貨號(hào)：CS-5449E

檢測(cè)原理：

大鼠脫氫表雄酮硫酸酯 (DHEA-S) elisa 試劑盒的原理是?競(jìng)爭(zhēng)法?，通過(guò)固相載體包被抗原，樣本中抗原與固相抗原競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合特異性抗體，最后通過(guò)底物顯色反應(yīng)來(lái)定量檢測(cè)。

?固相化?：微孔板預(yù)先包被 DHEA-S 人工抗原。

?結(jié)合?：加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣本與特異性抗體混合液，DHEA-S 與固相抗原競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合抗體。

?檢測(cè)?：加入 HRP 標(biāo)記的二抗，與結(jié)合在固相載體上的抗體形成復(fù)合物。

?顯色?：加入 TMB 底物，被 HRP 催化后由藍(lán)色變?yōu)辄S色。

?測(cè)定?：用酶標(biāo)儀在 450nm 波長(zhǎng)測(cè)定吸光度 (OD 值)，濃度與 OD 值成反比。

實(shí)驗(yàn)步驟?：

?試劑準(zhǔn)備?：將試劑盒平衡至室溫(20-25℃)，洗滌緩沖液按1:19稀釋。標(biāo)準(zhǔn)品梯度稀釋至所需濃度。

?加樣?：每孔加入100μL標(biāo)準(zhǔn)品或樣本，37℃孵育90分鐘。

?洗滌?：棄去液體，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后甩干，重復(fù)5次。

?加檢測(cè)抗體?：每孔加入100μL檢測(cè)抗體-HRP，37℃孵育60分鐘。

?洗滌?：同步驟3。

?顯色?：每孔加入90μL TMB底物A+B混合液，37℃避光孵育15分鐘。

?終止?：每孔加入50μL終止液，立即搖勻（顏色由藍(lán)變黃）。

?檢測(cè)?：450nm波長(zhǎng)測(cè)定吸光度(OD值)，15分鐘內(nèi)完成。

公司正在出售的產(chǎn)品：

關(guān)鍵實(shí)操技巧：

?1.加樣技巧

一次性換新槍頭，垂直貼孔壁低位加液；避免氣泡、飛濺交叉污染；整板加樣速度均勻統(tǒng)一。

2.溫育控溫

須37℃恒溫、封板膜嚴(yán)實(shí)防蒸發(fā)冷凝；時(shí)間嚴(yán)格卡死，過(guò)長(zhǎng)背景高、過(guò)短信號(hào)低。

3.洗板核心

每孔注滿不溢出，浸泡≥30 s；拍干用無(wú)塵吸水紙，杜絕殘留；洗板不足直接高背景、假陽(yáng)性。

4.樣本規(guī)范

杜溶血、脂濁、污染樣本；禁止反復(fù)凍融；嚴(yán)禁含 NaN?抑制 HRP 活性；濃度超標(biāo)只用試劑盒配套稀釋液。

5.顯色與讀數(shù)

全避光；整板顯色時(shí)長(zhǎng)一致；加終止液立刻讀數(shù)，放置越久數(shù)值漂移越大。

6.基礎(chǔ)質(zhì)控

樣本、標(biāo)準(zhǔn)均做復(fù)孔；室溫潔凈避光操作；試劑分裝取用，減少反復(fù)開蓋失效。